В качестве контроля использовали форсколин, который является неспецифическим активатором аденилатциклазы, запускающий экспрессию люциферазы в обход рецепторов.

Результаты показали дозозависимое увеличение люминесценции, подтверждающее корректную работу сигнального пути от аденилатциклазы до люциферазы.

Это свидетельствует о готовности системы для введения GIP-рецептора.

Перед интеграцией GIP-рецептора в геном клеток HEK293-TN-CreLuc проверена функциональность репортерной системы с помощью люциферазного теста.

Механизм действия Форсколина
По Insel, P.A. et al, 2003, https://doi.org/10.1023/A:1023684503883

Точки эмиссии Firefly люциферазы (люминисценция)

Дозозависимая кривая активности Форсколина

EC50 ≈ 19.7 мкМ

Мы провели люциферазный тест на клетках с GIPR. Действительно продемонстрирован дозозависимый эффект активации сигнального пути. Контрольный препарат тирзепатид сработал так, как ожидалось, EC50 составил 0,129 нМ. Новый антителоподобный кандидат, созданный учёными из университета "Сириус», также показал отличные результаты, EC50 всего 0,0105 нМ, что указывает на высокую биологическую активность.

А как вы тестировали, насколько работоспособны ваши клетки с рецептором GIP?

Критериями приемлемости данных является значение CV%, который отражает разброс данных. Во всех тестах CV был менее 20%, что соответствует общепринятым стандартам и подтверждает стабильность результатов. Также рассчитан коэффициент детерминации, он показывает, насколько хорошо модель предсказывает тренд. У нас он также вполне приемлим.

Насколько вы уверены в результатах?