"Фитнес" макрофаги против опухоли

Левчук Ксения Александровна
Преподаватель
Пухальская Тамара Владимировна
Преподаватель
Руководители проекта
Демидов Олег Николаевич
Богданова Дарья Алексеевна
Руководитель
Руководитель

Колосова Екатерина Дмитриевна

Преподаватель

Лисица Дарья Андреевна

Преподаватель

Участники проекта

Чеченина Юлия Михайловна

Кирпичев Прохор Андреевич

Ковалева Алёна Владимировна

Садыков Амир Ильнурович

Краева Ксения Сергеевна

Куманяйкина Виолетта Николаевна

Актуальность проекта

Рак остается одной из ведущих причин заболеваемости и смертности во всем мире. По данным ВОЗ за 2024 год, было зарегистрировано около 20

млн. случаев заболевания раком.

Риск заболевания раком существует у каждого второго мужчины и каждой второй женщины.

Одним из способов лечения является иммунотерапия, которая имеет преимущества, такие как длительность действия, меньшее количество побочных эффектов.



Как тренируется иммунитет?

Гипотеза

БЦЖ стимулирует активацию макрофагов, что приводит к их преимущественному переходу к провоспалительным фенотипу (М1), вызывая более выраженный иммунный ответ

Цель

Исследование механизмов формирования тренированного иммунитета в in vitro модели БЦЖ-терапии на опухоли рака мочевого пузыря.

Схема исследования

Используемые методы

Проточная цитометрия - это метод анализа клеток, при котором подкрашенные антителами с флуоресцентными метками клетки проходят через лазерный луч, и прибор определяет характеристики каждой отдельной клетки.

Цитометрия
Иммуноферментный анализ (ИФА) — это лабораторный метод диагностики, позволяющий выявить наличие определенных белков.

Иммуноферментный анализ

РТ-ПЦР

Реал Тайм ПЦР - представляет собой метод амплификации и одновременного измерения количества ДНК в режиме реального времени. Во время реакции используются специальные флуоресцентные метки, которые позволяют отслеживать процесс увеличения числа копий целевой последовательности ДНК прямо во время цикла реакций.

Определение фенотипа TAMs
H3K9me3 - ингибиторная метка.

После тренировки
Конфокальная микроскопия
Выводы

  1. В зависимости от секретома опухолевых клеток макрофаги показали различные направления поляризации: TAMs T-24 преимущественно приобретают фенотип M1, TAMs RT-4 фенотип M2
  2. Тренировка БЦЖ усиливает экспрессию TNF и секрецию IL6 в ответ на вторичный стимул, как в TAMs T-24 (М1) так и в TAMs RT-4 (М2)
  3. Тренировка БЦЖ приводит к эпигенетическому репрограммированию TAMs и снижению репрессивной метки хроматина H3K9me3

Наша работа

"Фитнес" макрофаги против опухоли

Пухальская Тамара Владимировна

Преподаватель

Демидов Олег

Николаевич

Руководитель

Богданова Дарья

Алексеевна

Руководитель

Руководители проекта

Левчук Ксения

Александровна

Преподаватель

Колосова Екатерина Дмитриевна

Преподаватель

Лисица Дарья

Андреевна

Преподаватель

Участники проекта

Чеченина Юлия Михайловна

Кирпичев Прохор Андреевич

Ковалева Алёна Владимировна

Садыков Амир Ильнурович

Краева Ксения Сергеевна

Куманяйкина Виолетта Николаевна

Актуальность проекта

Рак остается одной из ведущих причин заболеваемости и смертности во всем мире. По данным ВОЗ за 2024 год, было зарегистрировано около 20

млн. случаев заболевания раком.

Риск заболевания раком существует у каждого второго мужчины и каждой второй женщины.


Одним из способов лечения является иммунотерапия, которая имеет преимущества, такие как длительность эффекта, меньшее количество побочных эффектов.



Как тренируется иммунитет?

БЦЖ стимулирует активацию макрофагов, что приводит к их преимущественному переходу к провоспалительным фенотипу (М1), вызывая более выраженный иммунный ответ

Исследование механизмов формирования тренированного иммунитета в in vitro модели БЦЖ-терапии на опухоли рака мочевого пузыря.

Гипотеза

Схема исследования

Используемые методы

Проточная цитометрия - это метод анализа клеток, при котором подкрашенные антителами с флуоресцентными метками клетки проходят через лазерный луч, и прибор определяет характеристики каждой отдельной клетки.

Цитометрия

Иммуноферментный анализ (ИФА) — это лабораторный метод диагностики, позволяющий выявить наличие определенных белков.

Иммуноферментный анализ

РТ-ПЦР
Определение фенотипа TAMs

Реал Тайм ПЦР - представляет собой метод амплификации и одновременного измерения количества ДНК в режиме реального времени. Во время реакции используются специальные флуоресцентные метки, которые позволяют отслеживать процесс увеличения числа копий целевой последовательности ДНК прямо во время цикла реакций.

H3K9me3 - ингибиторная метка.

После тренировки
Конфокальная микроскопия
Выводы

  1. В зависимости от секретома опухолевых клеток макрофаги показали различные направления поляризации: TAMs T-24 преимущественно приобретают фенотип M1, TAMs RT-4 фенотип M2
  2. Тренировка БЦЖ усиливает экспрессию TNF и секрецию IL6 в ответ на вторичный стимул, как в TAMs T-24 (М1) так и в TAMs RT-4 (М2)
  3. Тренировка БЦЖ приводит к эпигенетическому репрограммированию TAMs и снижению репрессивной метки хроматина H3K9me3

Наша работа