Объект исследования:
ДНК-полимераза
ДНК-полимераза
Taq полимераза - это термостабильная ДНК-полимераза I, названная в честь термофильного эубактериального микроорганизма Thermus aquaticus, из которого она была первоначально выделена. Оптимальная температура для максимальной активности Taq-полимеразы составляет 70-75°С, а термостабильность она проявляет даже при 92°С., следовательно, фермент идеально подходит для использования в ПЦР.
Эксперимент 1:
титрование полимеразы
Требуется подобрать оптимальную концентрацию Taq-полимеразы. Для достижения следующей задачи использовали метод титрования.
После постановки ПЦР с различным разведением полимеразы мы определили, что оптимальная концентрация для систем праймеров с зондами на гены 23s и VanA равна 0,55 мкл на реакцию, а для систем на mcr1 и ACTB это значение по эффективности незначительно отличалось от более больших концентраций.
После постановки ПЦР с различным разведением полимеразы мы определили, что оптимальная концентрация для систем праймеров с зондами на гены 23s и VanA равна 0,55 мкл на реакцию, а для систем на mcr1 и ACTB это значение по эффективности незначительно отличалось от более больших концентраций.