Генетика и биомедицина
Разработка метода оценки
функциональной активности рекомбинантных аденоассоциированных вирусных частиц
В чем актуальность нашего проекта?
Миодистрофия Дюшенна — наследственная прогрессирующая мышечная дистрофия, которая начинается в раннем возрасте. Продолжительность жизни людей с данным заболеванием составляет порядка 20 лет. На сегодняшний день лекарство от этого заболевания не разработано.
Наш проект исследует метод, который будет использоваться для оценки эффективности разрабатываемого генно-терапевтического препарата.
Какой метод будет использоваться при создании лекарственного препарата?
Заболевание связано с поломкой гена дистрофина. Когда данный белок не синтезируется, миоциты погибают из-за деформации мембраны. Перспективной терапией данного заболевания могут стать препараты на основе аденоассоциированных вирусов (AAV).
AAV - самые мелкие вирусы, которые не могут размножаться в клетке без присутствия аденовируса, но они прекрасно подходят для доставки генетических конструкций.

Дистрофин необходим мышечным клеткам для восстановления их формы после сокращения. В случае, когда данный белок не синтезируется, миоциты погибают из-за деформации мембраны.

Задачи
rAAV9 - рекомбинантный аденоассоциированный вирус 9 серотипа
CK8 - креатинкиназный промотор
GFP - Green Fluorescent Protein
1
Показать специфичность промотора СК8 в мышечных клетках в экспериментах in vitro
2
Подобрать наиболее эффективную концентрацию rAAV9 для трансдукции мышечных клеток
3
Оценить прирост на уровне белка в экспериментах in vitro при заражении вирусными частицами с miDMD

План эксперимента

Ход работы

В нашем исследовании используются AAV9 c повышенным сродством к миоцитам. СК8 - промотор, специфичный для мышечных клеток. Ген GFP необходим для визуальной оценки эффективности трансдукции данным вирусом.


AAV9 - аденоассоциированный вирус 9 серотипа
CK8 - креатинкиназный промотор
GFP - Green Fluorescent Protein

Этапы работы

Результаты
1
Показана специфичность промотора СК8 в
миотрубочках в экспериментах in vitro
2
Подобрана наиболее эффективная концентрация rAAV9 для трансдукции мышечных клеток
3
При заражении вирусными частицами с miDMD наблюдается прирост на уровне белка в экспериментах in vitro

Фотоотчет

Команда
Бадэ Вероника Николаевна
Пискунов Александр Александрович
Бутенко Дарья Игоревна
Габдрахманова Алина Фаритовна
Семихина Анастасия Олеговна
Чепелева Мария Александровна
Алаева Любовь Викторовна
Богорубов Максим Евгеньевич
Гилязутдинова Камиля Ильясовна
Долгова Юлия Алексеевна
Ткачук Анастасия Петровна


8 (495) 988-47-94
Generium@Generium.ru
ул. Тестовская, 10, Москва, 123317