Ха! Попались! А мы не про лампы:)
OK
LAMP
Loop-mediated isothermal amplification — это метод петлевой изотермической амплификации
LAMP
LAMP – это метод амплификации нуклеиновых кислот, где реакция проходит при постоянной температуре с применением ДНК полимеразы, способной вытеснять вторую цепь ДНК, и праймеров, в процессе связывания которых формируются продукты амплификации
Как работает LAMP: поэтапная схема реакции
Схема иллюстрирует 9 этапов реакции: от связывания внутренних (F2, B2) и внешних (F3, B3) праймеров с целевой последовательностью ДНК до формирования гантелевидных структур. Благодаря вытесняющей активности Bst-полимеразы реакция протекает при постоянной температуре 60–65°C без термической денатурации. Петлевые праймеры ускоряют амплификацию, а образующиеся петлевые структуры обеспечивают высокую специфичность и чувствительность метода.
Для разработки LAMP тест системы необходимо было проверить подобранные заранее наборы праймеров с помощью программы NEB LAMP на те же гены бактериальных патогенов, которые использовались в ПЦР тест системе. Мы провели анализ подобранных наборов праймеров на чувствительность. Из графиков амплификации видно, что во всех образцах реакция проходит только с исходным образцом, что означает, что был достигнут предел концентрации, которую может идентифицировать тест-система и этого достаточно, для идентификации патогенов у пациентов, а также система обладает высокой специфичностью.


Ключевые преимущества метода LAMP
  • Простота оборудования (Изотермичность)
    Реакция протекает при постоянной температуре (60–65°C). Вам не нужен дорогой классический термоциклер — достаточно простой водяной бани, термостата или компактного изотермического амплификатора.
  • Высокая скорость анализа
    Полная амплификация занимает всего 20–40 минут, что значительно быстрее стандартной ПЦР. Это критически важно для экспресс-диагностики.
  • Высокая специфичность
    Использование 4–6 праймеров, которые распознают 6–8 уникальных участков целевой ДНК, гарантирует точность. Метод позволяет обнаружить даже единичные копии мишени, сводя к нулю риск ложноположительных результатов.
  • Визуальная детекция результатов
    Продукты реакции можно оценить невооруженным глазом: по изменению цвета индикатора (колориметрия), появлению осадка (замутнение раствора) или свечению под синим светом. Это полностью исключает необходимость в гель-электрофорезе.
  • Устойчивость к ингибиторам
    LAMP-реакция гораздо менее чувствительна к примесям в биологических образцах по сравнению с ПЦР. Это позволяет упростить этап выделения ДНК/РНК или вовсе пропустить его.
  • Идеален для полевых условий
    Благодаря отсутствию требований к сложной инфраструктуре, метод отлично подходит для диагностики «у постели больного», в аэропортах, ветеринарных клиниках, сельском хозяйстве и удаленных полевых лабораториях.