Формирование 3D-структур
Поскольку хондроциты являются механочувствительными клетками, для поддержания функциональной активности, максимально приближенной к нативной ткани, необходимо формирование трехмерной структуры. Сфероиды и мультихондропланты (МХП) позволяют клеткам формировать межклеточные связи, взаимодействовать с окружающим пространством, что способствует синтезу внеклеточного матрикса.
Для формирования сфероидов определенное количество клеток инкубировали в лунках 96-луночных планшетов. Лунки планшета перед помещением клеток покрывали специальным неадгезивным покрытием, которое препятствует прикреплению клеток к поверхности лунок и способствует формированию сфероидов.
Для формирования МХП клетки поэтапно наслаивали в чашках Петри. После нанесения последнего слоя клеточный агрегат собирали в комок (незрелый МХП), который затем дозревал в чашке Петри при постоянном перемешивании на орбитальном шейкере.